В результате слияния двух частных авиакомпаний, «Аэролот» и «Аэро», 29 декабря 1928 года была создана компания LOT Польские авиалинии.  Она начала фактическую деятельность 1 января 1929 года, став одним из старейших действующих авиаперевозчиков в мире.

Начало деятельности LOT было скромным, но полным амбиций. Ее парк состоял из 21 самолета, которые обслуживали как внутренние, так и международные маршруты. Первый рейс в Бухарест, запущенный 1 апреля 1930 года, ознаменовал начало экспансии авиакомпании на международную авиационную арену. Вскоре последовали и другие направления, такие как Афины, Бейрут и Хельсинки.

В 1930 г. » LOT» вступила в престижный состав Международной ассоциации воздушного транспорта (IATA). В 1933 г. LOT перенесла свою базу из аэропорта Мокотов на новую, современную взлетно-посадочную полосу в Окенце. В 1935-1936 годах флот компании пополнился самыми современными на тот момент самолетами, такими как Douglas DC-2, Lockheed L-10A Electra и Junkers Ju 52/3m, а позже Lockheed L-14H Super Electra.

В 1930-е годы компания LOT стала свидетелем и участником значительных событий в истории авиации. В 1938 году генеральный директор компании, майор-пилот Вацлав Маковски, вместе с пилотом Збигневом Высекиерским совершил первый перелет двухмоторного самолета связи с завода в США в Варшаву.  Он длился 85 часов и преодолел 24 850 км.

Накануне Второй мировой войны, в 1939 году, в парке «LOT» насчитывалось 26 самолетов и работало 694 высококвалифицированных сотрудника. Сеть воздушных сообщений LOT имела протяженность 10 200 км и охватывала 15 стран. Начало Второй мировой войны, вызванное вторжением Третьего рейха в Польшу в сентябре 1939 года, жестоко прервало развитие LOT. Большая часть флота была уничтожена или интернирована, а деятельность компании приостановлена. Деятельность возобновилась только после 1945 года.